Menurut statistik WHO, selama 40 tahun terakhir, 25 juta orang telah meninggal karena AIDS. Kerusakan akibat infeksi ini sangat besar. Sebagian besar yang terinfeksi ternyata berada di Afrika, tempat asal infeksi ini. Dengan HIV, diagnosis penyakit menjadi sangat relevan. Benar, HIV belum ada obatnya, tetapi pengobatan dini dapat memperpanjang hidup pasien dan meningkatkan kualitasnya.
Diagnosis infeksi HIV
Infeksi HIV ditentukan pada tahap yang berbeda dengan metode berikut:
- ELISA - enzim immunoassay.
- Western blot.
- PCR - reaksi berantai polimerase.
- Tes cepat.
Metode PCR dikembangkan oleh ahli biokimia Amerika Kary Mullis, yang menerima Hadiah Nobel untuk itu pada tahun 1983. Saat ini, metode kedokteran dalam diagnosis semua infeksi ini dianggap yang terdepan karena keakuratan dan kandungan informasinya. HIV tidak terkecuali dalam hal ini.
Inti dari analisis
Setiap sel hidup mengandung RNA dan DNA. Asam nukleat ini mampu menggandakan diri dan mereplikasi diri. Untuk setiap infeksi, fragmen DNA bersifat unik. PADAdalam cairan biologis, fragmen asam nukleat ini beredar. Mereka ditangkap dan dikenali oleh peralatan khusus - reaktor. Ini adalah dasar dari metode ini. Asisten laboratorium menghitung potongan-potongan ini. Retrovirus HIV dipantau untuk RNA. Bahkan dengan salinan tunggal partikel virus, PCR dapat mendeteksi dan menghitungnya.
Darah vena paling sering digunakan sebagai cairan uji. Komponen khusus dari metode ini mengikat partikel virus dan membuatnya dapat dideteksi, karena fragmen yang ditemukan berlipat ganda.
Dalam kasus HIV, hasil keberadaan virus dapat diperoleh jauh sebelum klinik muncul. Oleh karena itu, karena sensitivitasnya yang tinggi, PCR memiliki nilai diagnostik yang tinggi. Nilai tambah yang besar dari PCR adalah keserbagunaan metode ini. Masa inkubasi infeksi PCR tidak menjadi kendala.
Biaya penelitian
Metode PCR cukup mahal. Ini adalah salah satu kelemahan besar. Itu membutuhkan peralatan terbaru dan asisten laboratorium yang sangat berkualitas. Mengingat hal di atas, diagnostik PCR tidak dilakukan di pemukiman kecil. Anda dapat diuji hanya di klinik besar khusus.
Biaya tes DNA HIV di klinik Moskow mulai dari 2.800 rubel, viral load (RNA virus dalam plasma) ditentukan oleh PCR - dari 8.800 rubel, dan resistensi HIV terhadap PI - dari 16.500 rubel. Seperti yang Anda lihat, harganya cukup tinggi. PCR dapat dilakukan secara gratis di klinik umum di bawah kebijakan MHI. Penting,bahwa prosedur dapat dilakukan secara anonim. Dalam registri, pasien menerima nomor yang dengannya dia dapat mengetahui hasilnya. Di pusat medis modern ada akun pribadi klien di mana data ini akan dimasukkan.
Tujuan penelitian
Diagnosis PCR untuk HIV ditentukan dalam kasus seperti ini:
- Deteksi infeksi pada anak yang lahir dari ibu yang sakit atau karier untuk menentukan infeksi intrauterin.
- Jika ELISA memberikan hasil yang meragukan (PCR untuk HIV membantu dalam kasus ini untuk membuat diagnosis akhir).
- Untuk mendeteksi kandungan kuantitatif virus dalam tubuh.
- Dengan imunoblot positif, mereka saling melengkapi dengan PCR.
- Pengujian donor.
- Untuk diagnosis dini HIV.
- Untuk mengetahui kemanjuran dan resistensi terhadap ART.
Kelebihan analisis ini adalah PCR HIV dapat dilakukan bahkan untuk anak di bawah satu tahun.
Penelitian sering dilakukan bukan untuk diagnosis primer, tetapi sudah dalam proses pengobatan. Diagnostik primer adalah studi serologis (mereka menentukan tingkat antibodi terhadap HIV). Jika hasil positif palsu diulang, ini mungkin dengan viral load yang rendah.
PCR mendiagnosis HIV ketika belum ada antibodi terhadapnya. Metode ELISA dalam hal ini tidak akan memberikan jawaban.
Dan PCR untuk HIV sudah akan positif. Tetapi gejala periode HIV ini tidak spesifik. Pasien pertama kali dirawat untuk waktu yang lama dan tidak berhasil untuk ARVI oleh dokter umum. Harus diingat bahwa diagnosis HIV hanya didasarkan pada:PCR tidak dimasukkan, perlu untuk lulus tes komprehensif lainnya. Metode PCR lebih sering membantu untuk kasus-kasus sulit.
Mempersiapkan analisis
Sebelum mengambil PCR untuk HIV, 2 hari sebelum tes, Anda tidak boleh makan makanan berlemak, alkohol. Juga lebih baik tidak membebani mental dan fisik. Jika pasien diberi resep imunostimulasi, dihentikan 2 minggu sebelum analisis.
Darah paling baik diambil di pagi hari. Cairan biologis tubuh lainnya (sperma, cairan vagina) juga dapat diperiksa, tetapi darah adalah bahan terbaik. Air liur, keringat, urin, dan air mata tidak digunakan, karena kandungan virus di dalamnya minimal.
Kelebihan PCR untuk HIV
Keuntungan dari metode ini adalah kemungkinan yang sangat rendah dari hasil positif palsu, universalitas reaksi untuk setiap cairan biologis tubuh. Analisis memiliki jangkauan yang luas:
- Satu pengambilan darah dapat digunakan untuk mendeteksi infeksi yang berbeda.
- Tekniknya mendesak, hasilnya sudah siap keesokan harinya.
- Keyakinan antara 85 dan 98%.
- Adanya HIV dapat diketahui 10-14 hari setelah infeksi (saat ini belum ada antibodi).
- Tidak ada batasan usia, dapat dilakukan langsung sejak lahir.
Kekurangan metode
Kelemahan PCR adalah sebagai berikut:
- Biaya analisis.
- Memerlukan peralatan medis yang canggih.
- Memerlukan asisten laboratorium dan dokter yang berkualifikasi tinggi,analisis pengambil.
- Reaksinya sangat sensitif, jadi kesalahannya mungkin 20%.
- Dapat menghasilkan hasil positif palsu jika pasien memiliki proses autoimun, onkologi, infeksi kronis.
- Kebersihan khusus tempat laboratorium diperlukan, karena virus dapat masuk ke analisis dari udara. Maka hasilnya akan salah.
Untuk laboratorium yang melakukan PCR, untuk meningkatkan kualitas diagnostik, tindakan ketat khusus telah dikembangkan sesuai dengan sistem SanPiN untuk pengendalian internal. Selain itu, semua aturan kerja dengan teknik ini harus diperhatikan:
- Diharuskan untuk benar-benar mengikuti informasi pada tabung reaksi.
- Sebelum pengambilan sampel darah, periksa kembali dan pastikan analisis terjadwal.
- Perawat harus memberi label pada tabung dengan benar.
- Asisten laboratorium harus melakukan semua manipulasi biomaterial dengan benar untuk mencegah kontaminasi silang.
- Sistem pengujian harus berkualitas tinggi.
Hanya jika semua kondisi ini terpenuhi, kesalahan dalam jawaban hanya sekitar 2% dari episode.
Durasi analisis
Banyak yang penasaran berapa lama PCR HIV siap. Diagnosis berlangsung tidak lebih dari 8 jam. Pasien mungkin menerima jawaban pada hari berikutnya. Pengujian ekspres dilakukan dalam waktu 2 jam.
Keandalan PCR
Meskipun banyak kelebihannya, PCR tidak dianggap sebagai metode diagnostik yang ideal. Dia dihubungi untuk berjaga-jagakebutuhan untuk mendapatkan tes skrining untuk keberadaan HIV dalam tubuh.
Kapan darah diambil untuk analisis?
Berapa lama untuk mengambil PCR untuk HIV? Hasil yang andal sudah dapat diperoleh saat mengambil darah 4-4 hari setelah dugaan infeksi. Setelah 2 minggu, keandalan untuk HIV akan menjadi 98%, dan dengan jangka waktu 5 hari - 80%. Adanya hasil negatif pada PCR untuk HIV dapat diandalkan, tetapi untuk hasil yang benar-benar akurat, ELISA juga dilakukan.
Analisis ELISA hanya akan efektif jika ada antibodi terhadap virus, waktu ini bisa memakan waktu 1-3 bulan hingga enam bulan. Karena ELISA memberikan probabilitas yang lebih tinggi (98% -99,9%), PCR tidak dapat disebut sebagai tes konfirmasi 100% untuk keberadaan infeksi HIV. Tapi di sisi lain, ini adalah satu-satunya teknik di mana Anda tidak perlu menunggu munculnya antibodi.
Dengan HIV, PCR dapat memberikan informasi tentang efektivitas ART, stadium penyakit HIV dan jumlah VN (penilaian kuantitatif keberadaan HIV dalam tubuh). Ini akan menunjukkan tingkat keparahan dan tingkat perubahan.
Tes PCR untuk HIV juga diperlukan jika ada antibodi dalam darah, tetapi kehadirannya tidak menunjukkan keandalan infeksi HIV secara klinis.
Mereka diuji tidak hanya untuk infeksi dan seks bebas. Kesempatan lain:
- Merencanakan kehamilan.
- Operasi yang akan datang.
- Seks bebas.
- Beberapa profesi memerlukan tes ini untuk masuk kerja (guru, dokter, dan tenaga medis lainnya).
- Tahanan.
- pasien TB.
- Pegawai Kementerian Situasi Darurat dan polisi.
- Pulang dari liburan dari negara-negara eksotis (jika Anda ingin memastikan tidak ada infeksi).
- Pelacur.
- Mahasiswa asing.
- Narkoba.
Juga, gejala tertentu pada pasien dapat memaksa tes HIV:
- Penurunan berat badan secara tiba-tiba.
- Diare yang berlangsung lebih dari 3 minggu
- Suhu tinggi yang tidak masuk akal untuk waktu yang lama.
- Pembengkakan kelenjar getah bening.
- Penyebab pneumonia, kandidiasis, dll yang tidak dapat dijelaskan.
Menguraikan analisis adalah hak prerogatif dokter yang merawat, bukan asisten laboratorium.
PCR atau ELISA, mana yang lebih baik?
Saat PCR-diagnosis RNA virus HIV terdeteksi baik secara kualitatif maupun kuantitatif. Analisis ini dengan jelas mengidentifikasi patogen tertentu bahkan jika ada beberapa patogen yang bereaksi silang. Bahan biologis dapat digunakan bahkan dalam bentuk kering. Kelemahannya adalah sensitivitas PCR yang tinggi, ketika hasil positif palsu dapat diberikan bahkan dengan adanya sejumlah kecil DNA asing pada instrumen atau tabung reaksi.
Tugas dan kemungkinan ELISA adalah menentukan keberadaan antibodi terhadap retrovirus. Meskipun akurasinya 99%, itu tidak berlaku pada tahap awal.
Tes HIV kualitatif
PCR berkualitas tinggi untuk HIV menentukan keberadaan virus di dalam tubuh. Hasil dalam kasus ini akan terlihat seperti ini: positif, positif palsu, negatif. Namun penelitian ini tidak akan memberikan informasi mengenai jumlah retrovirus. Analisis kualitatif seperti itutidak tepat bila infeksi HIV telah terdeteksi di dalam tubuh dengan cara lain.
Tidak mungkin mengontrol efektivitas pengobatan dengan PCR berkualitas tinggi.
kuantisasi HIV
Hanya dilakukan oleh orang yang terinfeksi HIV untuk menghitung jumlah salinan RNA virus dalam produk biologis.
Tujuan dari penelitian semacam itu adalah untuk memantau pengobatan yang sedang berlangsung dan mengidentifikasi resistensi virus terhadapnya. Terapi antivirus dalam perhitungan seperti itu tidak diresepkan secara membabi buta oleh dokter, sehingga akan lebih efektif. PCR kuantitatif untuk infeksi HIV dilakukan lebih sering. Analisis ini ditampilkan sebagai salinan/ml darah.
Hasil apa yang dapat diberikan:
- Virus RNA tidak ada atau sangat kecil (sekitar 20 kopi/ml). Tidak ada kepastian diagnosis.
- Dari 20 - hingga 10 hingga salinan derajat ke-6 / ml - diagnosisnya dapat diandalkan.
- Lebih dari 106 eksemplar/ml - VN tinggi.
Laboratorium dapat melakukan pengujian PCR waktu nyata untuk HIV. Ini menyiratkan pengamatan dan evaluasi numerik dari akumulasi produk PCR dengan pencatatan hasil otomatis.
