Apa itu penelitian bakteriologis? Menurut skema apa itu dilakukan? Apa yang dimaksud dengan keselamatan dalam hal ini? Apa tujuan dan tahapan penelitian bakteriologis?
Informasi umum
Pemeriksaan bakteriologis adalah proses ilmiah di mana bakteri diidentifikasi dan sifat-sifatnya dipelajari untuk membuat diagnosis mikrobiologis. Sangat penting di sini adalah penentuan jenis atau spesies mikroorganisme yang dihasilkan (kultur murni tersirat). Ini disertai dengan studi tentang sifat biokimia dan fisiologis organisme, serta kecenderungan pembentukan toksin. Untuk tujuan ini, presipitasi dan reaksi aglutinasi digunakan. Hal ini juga dipraktekkan untuk menginfeksi hewan laboratorium dengan deteksi selanjutnya dari perubahan patologis.
Bekerja dengan bahan uji
Algoritme studi bakteriologis menyediakan kepatuhan yang ketat terhadap instruksi khusus. Dengan demikian, bahan uji harus dikumpulkan dalam cawan steril dalam kondisi aseptik. Hal ini juga perlu untuk menjagauntuk memastikan pengiriman ke laboratorium sesegera mungkin. Penyimpanan dingin sampel diinginkan. Teknik penelitian bakteriologis menyediakan banyak kemungkinan situasi. Dengan demikian, jenis objek, sifat mikroorganisme dan sifat penyakit sering membuat instruksi individu untuk bekerja perlu dikembangkan. Sejumlah besar metode yang berbeda digunakan dalam pekerjaan. Salah satu yang paling umum adalah bakterioskopi. Tetapi jika bakteri tidak diperbaiki, maka digunakan tetesan yang dihancurkan atau digantung. Perlu dicatat bahwa dua opsi terakhir ditandai dengan peningkatan tingkat penularan.
Bakterioskopi
Dalam hal ini, goresan digunakan. Untuk membuatnya, Anda perlu mendistribusikan setetes cairan yang sedang dipelajari di atas permukaan slide kaca. Zates harus mengeringkannya. Hal ini sering dilakukan dengan memindahkan obat melalui nyala api yang diperoleh dari kompor gas. Meskipun senyawa pengikat dapat digunakan sebagai alternatif. Untuk menunjukkan bahwa tindakan persiapan telah dilakukan dengan persiapan ini, itu diwarnai. Tujuan dari manipulasi tersebut adalah akurasi, yang sangat penting ketika pemeriksaan mikroskopis dan bakteriologis dilakukan. Lagi pula, jika Anda menggunakan kembali obat untuk tujuan lain, Anda mendapatkan bubur, yang akan sangat sulit untuk bekerja dengan efektif.
Mengapa bakterioskopi sangat populer
Paling tidak karena ketersediaan metode ini. Jika studi bakteriologis dari sediaan segar dilakukan, maka untuk menentukan patogenreaksi mikrokimia atau pewarnaan selektif dari berbagai bagian struktural mikroorganisme dapat digunakan. Mana yang lebih baik? Hasil yang lebih akurat dapat diperoleh saat bekerja dengan sediaan berwarna. Dalam hal ini, bahan uji diterapkan pada slide kaca yang sudah disiapkan sebelumnya. Dan pastikan untuk menipiskan (dan jika mungkin bahkan) lapisan. Setelah itu, Anda harus menunggu sampai obat mengering di udara. Mikroorganisme tersebut kemudian difiksasi menggunakan salah satu metode konvensional. Setelah itu, sediaan yang didinginkan dikenai pewarnaan dengan cat diferensial atau sederhana. Untuk ini, persiapan kering dan asli dapat digunakan. Setelah itu, tinggal mengarahkan sinar ultraviolet atau sinar biru pendek ke tempat akumulasi organisme, yang menyebabkan seluruh mikroba atau bagian tertentu dari tubuhnya bersinar.
Aplikasi praktis bakterioskopi
Ini digunakan untuk mendiagnosis sejumlah penyakit menular. Yang paling terkenal di antaranya adalah TBC, gonore, dan demam kambuhan. Selain itu, mereka menggunakan penelitian untuk mempelajari seluruh kompleks mikroflora suatu organ atau produk. Tetapi para kritikus sering menunjuk pada ketidakandalan dan ketidakakuratan relatif dari metode ini.
Tanaman dan subkultur dari kultur bakteri
Lakukan dengan menggunakan pipet Pasteur. Melakukan pemeriksaan bakteriologis dan sitologis seringkali sulit dilakukan tanpa inokulasi dan subkultur selama alur kerja. Saat bekerja dengan pipet Pasteur, ujungnyaputus dengan pinset. Alat itu sendiri kemudian dibawa melalui nyala api kompor dan kemudian dibiarkan dingin. Omong-omong, media nutrisi cair dan padat dapat digunakan untuk menabur. Pilihannya dipengaruhi oleh tujuan penelitian bakteriologis apa yang ingin dicapai. Pada saat yang sama, perlu untuk mematuhi algoritme kerja dan tindakan pencegahan keselamatan. Jadi, ketika bekerja dengan media nutrisi cair, perlu untuk memastikan bahwa itu tidak tumpah dan tidak membasahi tepi gabus dan tabung reaksi. Ketika penelitian dilakukan dengan bahan padat, jarum khusus sering digunakan untuk memasukkan budaya. Ketika penaburan dan penyemaian dilakukan, mereka harus dilakukan di dekat nyala api kompor gas. Untuk kemurnian percobaan, tabung reaksi tidak boleh dibiarkan terbuka untuk waktu yang lama. Adapun alat dengan budaya: Anda harus memastikan bahwa itu tidak menyentuh apa pun. Juga, teknik penelitian bakteriologis menyediakan untuk membakar tepi tabung reaksi sebelum menutupnya. Produk jadi harus segera ditandatangani setelah produksi untuk menghindari kebingungan di masa mendatang.
Efisiensi Menabur
Dipercaya bahwa metode ini memungkinkan perolehan data yang lebih akurat dan andal selama diagnosis bakteriologis daripada bakterioskopi yang dipertimbangkan sebelumnya. Dalam hal ini, algoritma tindakan adalah sebagai berikut:
- Awalnya, biakan murni dioleskan di atas permukaan media nutrisi, yang dituangkan ke dalam cawan Petri.
- Penaburan awal harus dilakukan dalam kondisi yang menguntungkan bagi spesiesmikroorganisme.
- Setelah satu atau dua hari, dengan adanya lingkungan yang optimal, semua koloni yang cocok pindah ke tempat mereka dapat berkembang secara maksimal. Ini membebaskan mereka, dengan demikian, dari mikroflora asing.
Hasil akhirnya adalah kultur bakteri homogen yang dapat diidentifikasi.
Budaya murni
Tapi bagaimana cara membuatnya? Untuk ini, metode biologis dan mekanis digunakan. Dalam kasus pertama, peran besar dimainkan oleh media nutrisi, di mana ada kondisi yang diperlukan yang menguntungkan untuk pengembangan budaya tertentu. Pendekatan juga dapat digunakan ketika hewan laboratorium yang rentan terhadap jenis bakteri tertentu terinfeksi. Metode mekanis didasarkan pada penggunaan instrumen steril, yang dengannya kultur ditempatkan dalam media nutrisi yang terletak di cawan Petri pertama, kedua dan ketiga. Maka perlu menunggu sampai koloni individu tumbuh, dan kultur murni sudah menonjol dari mereka. Bakteri juga dapat tumbuh di termostat khusus, di mana suhu dipertahankan pada tingkat tertentu (biasanya sekitar 37 derajat). Dalam hal ini, proses berlanjut selama sekitar satu hari. Tetapi, tergantung pada jenis mikroorganisme, istilah lain dapat ditetapkan. Juga penting adalah adanya konsentrasi oksigen yang dibutuhkan. Untuk melakukan ini, gunakan berbagai metode aerasi. Sejauh ini, kita telah berbicara tentang situasi secara keseluruhan dan secara umum, tetapi sekarang mari kita fokuskan perhatian kita pada skema penelitian bakteriologis.
Latihan
Serangkaian metode sering digunakan untuk mendeteksi mikroorganisme patogen dalam tubuh pasien atau pembawa potensial. Bahan dan metode yang digunakan tergantung pada tujuan analisis, serta pada kondisi lingkungan di mana pekerjaan dilakukan. Dalam praktiknya, paling sering bakteri dideteksi melalui kultur darah yang diambil dari seseorang atau hewan. Jika lesi lokal didefinisikan dengan baik, patogen dapat dicari di area masalah. Ini khas untuk penyakit seperti disentri, gonore, difteri, dan lain-lain. Pada kasus yang sangat parah, proses ini dibagi menjadi beberapa tahap pemeriksaan bakteriologis yang terpisah (yang khas untuk demam tifoid). Masing-masing dari mereka menggunakan metodenya sendiri, yang bertujuan untuk menemukan penyebab infeksi. Mari kita lihat lebih dekat situasi dengan demam tifoid. Pada minggu pertama penyakit, cara yang paling dapat diandalkan untuk mendiagnosis penyakit adalah kultur darah. Pada yang kedua, studi serologis dianggap seperti itu. Pada minggu ketiga, tinja diperiksa. Metode terakhir dianggap memeriksa pemulihan.
Identifikasi mikroorganisme
Berawal dari proses pewarnaan. Kemudian mereka melihat bagaimana bakteri dapat memecah karbohidrat, asam amino, dan sebagainya. Selain itu, proses ini dapat dilengkapi dengan studi tentang sifat-sifat lain yang dimiliki oleh masing-masing genus atau spesies mikroorganisme. Sebagai contoh, kemungkinan melarutkan eritrosit dari berbagai hewan, efek pada koagulasi plasma darah dan pembubaran bekuan harus diberikan.fibrin dan sebagainya. Semua ini adalah fitur diferensial dari perwakilan individu dari dunia mikro. Juga, identifikasi serologis dapat digunakan untuk pengenalan akhir (tetapi ini biasanya menyangkut bakteri patogen yang termasuk dalam famili usus).
Kesimpulan
Perlu dicatat bahwa sejumlah mikroorganisme tidak dapat diidentifikasi dengan metode yang dijelaskan dalam artikel. Dalam hal ini, praktik menginfeksi hewan laboratorium banyak digunakan. Perhitungan dibuat berdasarkan fakta bahwa karakteristik toksigenisitas atau patogenisitas akan muncul, yang tidak diamati dalam kondisi buatan. Infeksi juga dapat digunakan sebagai metode untuk akumulasi mikroba patogen. Dan ketika karakteristik kultur yang dipelajari, ditemukan dalam proses mempelajari sifat biologis, morfologis, serologis dan biokimiawi, dibandingkan, kita dapat mengatakan bahwa diketahui jenis mikroba yang kita hadapi. Identifikasi berarti penunjukan genus, spesies, dan jenis bakteri. Jika mikroorganisme yang diteliti menyimpang dalam sifat-sifat tertentu dari karakteristik khasnya, maka ini harus ditunjukkan. Sejumlah ahli percaya bahwa dalam kasus seperti itu akan berguna untuk mengidentifikasi kembali dengan duplikasi semua metode dan teknik yang digunakan. Terkadang penelitian dapat dibawa ke tingkat berikutnya, yang membutuhkan pendekatan yang lebih serius (dan lebih mahal). Jika hasil negatif diperoleh, maka ini menunjukkan bahwa persiapanmikroorganisme tidak ada atau tidak dapat hidup. Namun untuk akurasi penelitian, jika dicurigai sejumlah pembawa basil (disentri, difteri, demam tifoid), pemeriksaan berulang ditunjukkan dalam kasus tersebut. Ini diperlukan agar spesialis memiliki gagasan yang akurat tentang apa yang harus mereka tangani.
